久久久无码精品国产一区-欧美颜射内射中出口爆在线-亚洲色无码专区在线观看精品-国产精品 高清 尿 小便 嘘嘘-成年午夜性影院

產品分類

PRODUCT CATEGORY

新聞中心/ NEWS CENTER

我的位置:首頁  >  新聞中心  >  質粒的制備

質粒的制備

更新時間:2012-05-16      瀏覽次數:1907


 
電泳檢驗測定:質粒電泳普通有三條帶,作別為質粒的超螺旋、開環、線型三種構型

吸光值檢驗測定:認為合適而使用分光光度計檢驗測定260nm、280nm波長吸光值,若吸光值260nm/280nm的比率介于1.7-1.9之間,解釋明白質粒品質較好,1.8為*,低于1.8解釋明白有氨基酸污染,大于1.8解釋明白有RNA污染。

實驗材料:包括質粒pUC18載體的結腸桿菌菌液,克隆有稻子外源斷片的BAC的結腸桿菌菌液電熱恒溫鼓風干燥箱。

實驗原理:在pH 12.0 ~ 12.6堿性背景中,球菌的線性大分子量染色體DNA改變性別分開,而共價閉環的質粒DNA固然改變性別但仍處于拓撲攪擾狀況。將pH調至中性并有高鹽存在及低溫的條件下,大多染色體DNA、大分子量的RNA和氨基酸在去污劑SDS的效用下形成沉淀,而質粒DNA還是為可溶狀況。經過離心,可去掉除掉大多細胞碎片、染色體DNA、RNA及氨基酸,質粒DNA尚在上清中,而后用酚、氯仿抽提進一步醇化質粒DNA。

實驗步驟:

1.取包括pUC18質粒的結腸桿菌菌液于LA營養物質上真空干燥箱37℃過夜培育;

2.汲取1.5 ml菌液,12000 g離心2分鐘,使聚在一起菌體,倒掉菌液;汲取1.5 ml菌液,再次使聚在一起菌體,盡力將菌液倒整潔;

3.參加300 ml溶液 I振動打勻,從新懸浮細胞,震動混電熱鼓風干燥箱勻(注意:應*打勻沉淀或碎塊);

4.用無菌牙簽兒挑取單菌落,接種于包括Amp抗生素的LB營養物質中,37℃搖床~250 r/min過夜培育;

5.參加300 ml溶液III顛倒混勻,安放于冰上10分鐘,使雜質充分沉淀;

6.參加300 ml溶液II,輕柔顛倒混勻,安放至清脆,普通不超過5分鐘;

7.12000 g離心10分鐘;

8.汲取800 ml上清液(注意:不要汲取到漂浮的雜質)至另一Eppendorf管中,參加2/3大小的異丙醇,室溫下安放5分鐘干燥箱;

9.質粒、BAC的品質檢驗測定,于-20℃保留。

10.倒盡上清,加75酒精浸洗除鹽(安放一會兒或離心3分鐘后倒去上清);

11.12000 g 常溫離心15分鐘;

12.室溫安放或超凈臺上風干DNA;

13.加40 ml滅菌超純水或TE溶解;


 
 
 

電話:TEL

021-57431317

地址:ADDRESS

上海市奉賢區南橋鎮江海村744號(1號倉庫)

掃碼加微信

主站蜘蛛池模板: 夜色人妻一区二区三区| 麻豆精产一二三产区| 女人被男人爽到呻吟的视频| 18禁超污无遮挡无码免费网站国产| 两个人日本www免费版| 午夜理论电影在线观看亚洲| 精品无码一区二区| 色丁香婷婷综合久久| 国产成人无码18禁午夜福利p| 无码熟妇人妻av影片在线| 亚洲中文字幕精品久久久久久动漫| 亚洲天堂2017无码| 国产精品久久久久秋霞鲁丝 | 色狠狠一区二区三区香蕉| 欧美另类高清zo欧美| 亚洲欧美日韩人成在线播放 | 精品成人免费国产片| 中文字幕不卡av无码专线一本| 加勒比在线一区二区三区| 欧美性情影视一区二区三区| 国产妇女馒头高清泬20p多毛| 人妻激情偷乱一区二区三区| 果冻传媒av精品一区| 伊人久久综合无码成人网| 精品一区heyzo在线播放| 激情视频网站| 国内揄拍国内精品| 亚洲成av人片乱码色午夜| 亚洲综合av色婷婷| 亚洲色成人一区二区三区小说| 亚洲国产精品无码观看久久| 少妇做爰免费视频网站| 私人影院午夜一区二区| 毛片免费在线播放一区| 国产精品青草久久久久福利99| 在线a亚洲老鸭窝天堂av高清| 欧美国产激情18| 天堂va欧美ⅴa亚洲va在线| 日韩电影一区二区三区| 蜜桃视频久久一区免费观看入口| 欧美一区二区专区|